临床的卵巢早衰(POF)是指卵巢功效提前减退，，，，通常体现为女性在40岁以前泛起闭经，，，，以闭经、不育、雌激素缺乏以及促性腺激素水平升高为特征
。。。。。。人群发病率约为1%~3%，，，，在继发性闭经中占2%~10%
。。。。。。诊断以闭经持续至少4个月（或半年以上）、扫除其他原由于基础
。。。。。。卵巢早衰是妇科内渗透领域的常见病
。。。。。。

POF病因多种多样，，，，详细发病机制尚不清晰
。。。。。。为寻找病因和有用治疗要领，，，，必需建设与人类临床体现和发病机制相似的动物模子
。。。。。。海内外专家学者鉴于POF病因的多样性，，，，建设了差别的动物模子
。。。。。。

1、质料与要领

1.1 实验质料
雌性Wistar大鼠
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1.2 实验动物分组
选用雌性Wistar大鼠40只，，，，体重260~300 g，，，，随机分为正常比照组和实验模子组各20只
。。。。。。

1.3 实验要领
1.3.1 POF大鼠模子制备 实验模子组雌性Wistar大鼠用雷公藤多甙片(10 mg/片)，，，，0.6 mg/(100 g?d)体重，，，，灌胃1次/d，，，，连续9d，，，，建设POF动物模子
。。。。。。

1.3.2 组化标本制备
对实验动物用1％戊巴比妥钠(40ml/kg)腹腔麻醉后开胸，，，，经左心室70滴/min滴入1％肝素钠的心理盐水500ml，，，，同时剪开右心耳
。。。。。。继用0.1m磷酸盐缓冲液(PBS,PH=7.4)配制的牢靠液(含4％多聚甲醛)灌流牢靠
。。。。。。取出实验动物的卵巢组织，，，，放入含4％多聚甲醛PBS的牢靠液中举行后牢靠约莫2h，，，，之后将实验动物的卵巢组织切成薄片移入含20％蔗糖的PBS中
。。。。。。在4℃冰箱中存放，，，，至组织薄片沉底，，，，经水包埋，，，，恒冷箱连续横切片，，，，片厚20μm
。。。。。。经OCT包埋，，，，恒冷箱连续切片，，，，片厚16 μm，，，，-70℃生涯备用
。。。。。。

1.3.3 尼氏染色
冷冻切片吹干，，，，经PBS漂洗（5 min×3次），，，，将切片置入1%甲苯胺蓝溶液中37℃孵育90min，，，，取出后用蒸馏水冲洗，，，，PBS漂洗（5 min×3次），，，，梯度乙醇脱水，，，，二甲苯透明，，，，中性树胶封片，，，，光湿微镜下视察
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2、效果

尼氏染色效果:
（1）正常比照组大鼠卵巢的尼氏染色切片上，，，，卵泡数目正常，，，，卵泡无闭锁，，，，间质无显着增生
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（2）实验模子组大鼠卵巢可见卵巢萎缩，，，，卵泡数目镌汰，，，，卵泡闭锁增多，，，，间质增生显着
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（3）凭证尼氏染色效果证实POF动物模子制备乐成
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3、讨论

由于POF的病因与发病机制尚不清晰，，，，为寻找有用的治疗要领及探索其爆发生长纪律，，，，建设切实可靠的POF模子显得尤为主要
。。。。。。从现在种种造模效果来看，，，，药物型POF模子简朴可靠、容易操作，，，，可作为研究POF的模子
；；；；；但由于要领尚不敷成熟，，，，需进一步探讨药物剂量与给药时间，，，，以构建最理想的模子
。。。。。。在造模的同时，，，，还需探讨药物对其他器官（如肝、肾、神经系统等）的影响，，，，为临床治疗提供更周全的数据
。。。。。。这对剖析POF发病机制、指导临床清静用药具有更主要的意义
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